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腫瘤相關巨噬細胞來源外泌體在胃癌轉移、耐藥中的作用及機制

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腫瘤相關巨噬細胞來源外泌體在胃癌轉移、耐藥中的作用及機制
論文目錄
 
摘要第1-4頁
abstract第4-6頁
符號說明第6-11頁
緒論第11-18頁
第一部分 胃癌組織中M2型巨噬細胞浸潤與胃癌的進展密切相關第18-35頁
  1.1 材料與方法第18-27頁
    1.1.1 主要儀器第18頁
    1.1.2 主要試劑第18-19頁
    1.1.3 組織標本第19頁
    1.1.4 免疫組織化學第19-21頁
    1.1.5 組織標本消化第21-22頁
    1.1.6 流式細胞術分析組織來源巨噬細胞表型第22-23頁
    1.1.7 流式分選組織來源巨噬細胞第23-24頁
    1.1.8 RNA提取與測定第24-25頁
    1.1.9 Real-time PCR第25-27頁
    1.1.10 統計分析第27頁
  1.2 實驗結果第27-33頁
    1.2.1 胃癌組織中有大量TAMs浸潤并且與胃癌的分期及進展呈正相關第27-29頁
    1.2.2 胃癌組織中浸潤TAMs主要為M2型巨噬細胞第29-31頁
    1.2.3 胃癌組織中TAMs的浸潤與胃癌的轉移及不良預后密切相關第31-33頁
  1.3 討論第33-35頁
第二部分 M2型巨噬細胞通過外泌體傳遞促進胃癌細胞的轉移、耐藥第35-66頁
  2.1 材料與方法第36-51頁
    2.1.1 主要儀器第36頁
    2.1.2 主要試劑第36-38頁
    2.1.3 細胞來源及培養第38頁
    2.1.4 體外巨噬細胞極化模型的構建第38-40頁
    2.1.5 流式細胞術分析體外誘導巨噬細胞表型第40頁
    2.1.6 細胞免疫熒光第40-41頁
    2.1.7 Elisa檢測巨噬細胞培養上清細胞因子第41頁
    2.1.8 細胞RNA的提取及Real-time PCR檢測第41-44頁
    2.1.9 細胞共培養及transwell實驗第44-45頁
    2.1.10 外泌體的分離與鑒定第45-46頁
    2.1.11 細胞活性檢測第46-47頁
    2.1.12 細胞周期分析第47-48頁
    2.1.13 細胞凋亡分析第48頁
    2.1.14 蛋白免疫印跡第48-49頁
    2.1.15 裸鼠體內動物實驗第49-50頁
    2.1.16 統計分析第50-51頁
  2.2 實驗結果第51-63頁
    2.2.1 體外誘導極化巨噬細胞的鑒定第51-55頁
    2.2.2 M2型巨噬細胞促進胃癌細胞的遷移和侵襲第55-56頁
    2.2.3 M2型巨噬細胞促進胃癌細胞對順鉑的化療耐藥第56-58頁
    2.2.4 M2型巨噬細胞來源外泌體的分離、鑒定及攝取實驗第58-59頁
    2.2.5 M2型巨噬細胞來源外泌體促進胃癌細胞的遷移和侵襲第59-61頁
    2.2.6 M2型巨噬細胞來源外泌體促進胃癌細胞對順鉑的化療耐藥第61-63頁
  2.3 討論第63-66頁
第三部分 M2型巨噬細胞通過外泌體傳遞ApoE激活PI3K-AKT途徑促進胃癌細胞的轉移第66-89頁
  3.1 材料和方法第66-77頁
    3.1.1 主要儀器第66-67頁
    3.1.2 主要試劑第67-68頁
    3.1.3 細胞來源及培養第68-69頁
    3.1.4 體外巨噬細胞極化模型的構建第69頁
    3.1.5 流式細胞術分析體外誘導巨噬細胞表型第69頁
    3.1.6 M2型巨噬細胞來源外泌體的分離第69-70頁
    3.1.7 外泌體蛋白質譜分析第70-71頁
    3.1.8 載體轉染第71-72頁
    3.1.9 細胞免疫熒光第72頁
    3.1.10 Transwell實驗檢測胃癌細胞的遷移及侵襲能力第72-73頁
    3.1.11 胃癌細胞生長曲線第73頁
    3.1.12 細胞RNA的提取及RT-PCR檢測第73-75頁
    3.1.13 免疫蛋白印跡第75-76頁
    3.1.14 細胞周期及凋亡檢測第76頁
    3.1.15 免疫組織化學第76-77頁
    3.1.16 裸鼠體內肺部轉移實驗第77頁
    3.1.17 統計分析第77頁
  3.2 實驗結果第77-86頁
    3.2.1 M2型巨噬細胞高表達ApoE并且可以通過外泌體包裹傳遞至胃癌細胞第77-79頁
    3.2.2 M2型巨噬細胞通過外泌體傳遞ApoE從而增強胃癌細胞的轉移能力第79-81頁
    3.2.3 ApoE蛋白通過激活PI3K-AKT通路影響胃癌細胞的細胞骨架重塑從而增強其轉移能力第81-84頁
    3.2.4 臨床資料顯示ApoE的表達與胃癌的轉移及不良預后密切相關第84-86頁
  3.3 討論第86-89頁
第四部分 M2型巨噬細胞通過外泌體傳遞miR-21增強胃癌細胞對順鉑的化療耐藥第89-103頁
  4.1 材料和方法第89-95頁
    4.1.1 主要儀器第89-90頁
    4.1.2 主要試劑第90頁
    4.1.3 細胞來源及培養第90頁
    4.1.4 M2型巨噬細胞來源外泌體miRNA microarray第90頁
    4.1.5 miRNA mimics轉染第90-91頁
    4.1.6 細胞免疫熒光第91-92頁
    4.1.7 miRNA的提取及RT-PCR檢測第92-93頁
    4.1.8 免疫蛋白印跡第93頁
    4.1.9 細胞凋亡檢測第93-94頁
    4.1.10 細胞活性檢測第94頁
    4.1.11 平板克隆形成實驗第94頁
    4.1.12 裸鼠皮下成瘤實驗第94-95頁
    4.1.13 統計分析第95頁
  4.2 實驗結果第95-101頁
    4.2.1 M2型巨噬細胞通過外泌體傳遞miR-21分子至胃癌細胞第95-97頁
    4.2.2 體內外實驗證實miR-21促進胃癌細胞對順鉑的化療耐藥第97-99頁
    4.2.3 miR-21通過調控PTEN增強胃癌細胞的抗凋亡能力第99-101頁
  4.3 討論第101-103頁
全文總結第103-105頁
參考文獻第105-111頁
致謝第111-112頁
學術論文和科研成果目錄第112-114頁

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