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水環境中典型污染物促進抗生素抗性基因水平轉移機理研究

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水環境中典型污染物促進抗生素抗性基因水平轉移機理研究
論文目錄
 
摘要第1-7頁
Abstract第7-12頁
第1章 緒論第12-24頁
  1.1 抗生素抗性基因概述第12頁
  1.2 水環境中抗生素抗性基因的來源及傳播第12-13頁
  1.3 環境中抗生素抗性基因的污染現狀及危害第13-16頁
    1.3.1 污水處理廠中的ARGs第14頁
    1.3.2 受納水體中的ARGs第14-15頁
    1.3.3 畜禽養殖及農場土壤中的ARGs第15-16頁
  1.4 影響抗生素抗性基因傳播擴散的環境因素第16-20頁
    1.4.1 抗生素第16-17頁
    1.4.2 重金屬第17-18頁
    1.4.3 消毒劑及其副產物第18頁
    1.4.4 有機污染物第18-19頁
    1.4.5 其他因素第19-20頁
  1.5 研究意義和研究內容第20-24頁
    1.5.1 研究目的和意義第20頁
    1.5.2 研究內容第20-21頁
    1.5.3 技術路線第21頁
    1.5.4 創新點第21-24頁
第2章 實驗材料與實驗方法第24-30頁
  2.1 實驗材料與儀器第24-26頁
    2.1.1 主要實驗試劑與耗材第24-25頁
    2.1.2 主要實驗設備第25頁
    2.1.3 主要溶劑與培養基的配制第25-26頁
  2.2 水樣采集與預處理第26-27頁
  2.3 實驗方法第27-30頁
    2.3.1 水質指標測定第27頁
    2.3.2 定性PCR第27-28頁
    2.3.3 實時熒光定量PCR第28頁
    2.3.4 定量PCR標準曲線的建立第28-29頁
    2.3.5 數據分析方法第29-30頁
第3章 重金屬對抗生素抗性基因水平轉移的影響第30-42頁
  3.1 引言第30頁
  3.2 實驗材料與方法第30-33頁
    3.2.1 微宇宙水環境體系的建立第30-32頁
    3.2.2 水平轉移頻率的計算第32頁
    3.2.3 RP4質粒接合轉化體系第32-33頁
    3.2.4 接合子的鑒定和藥敏試驗第33頁
  3.3 結果與討論第33-39頁
    3.3.1 重金屬影響質粒RP4水平轉移第33-37頁
    3.3.2 接合子的菌種鑒定第37-38頁
    3.3.3 接合子的最小抑菌濃度(MIC)分析第38-39頁
  3.4 本章小結第39-42頁
第4章 銅促進抗性質粒水平轉移的作用機理第42-54頁
  4.1 引言第42-43頁
  4.2 實驗材料與方法第43-46頁
    4.2.1 微宇宙水環境體系的建立第43頁
    4.2.2 定性PCR和定量PCR第43-44頁
    4.2.3 透射電鏡(TEM)分析細胞形態學變化第44頁
    4.2.4 流式細胞儀分析細菌細胞膜通透性第44-45頁
    4.2.5 銅對抗生素和重金屬聯合抗性的作用第45-46頁
  4.3 結果與討論第46-53頁
    4.3.1 銅誘導抗性基因的動態變化第46-47頁
    4.3.2 銅增強RP4質粒介導的抗性基因的傳播第47-48頁
    4.3.3 接合子和相關基因與Cu濃度的相關性分析第48-50頁
    4.3.4 銅增強了細胞膜通透性第50-52頁
    4.3.5 銅對抗生素和重金屬聯合抗性的影響第52-53頁
  4.4 本章小結第53-54頁
第5章 咪唑類離子液體促進抗生素抗性基因的水平轉移第54-66頁
  5.1 引言第54-55頁
  5.2 實驗材料與方法第55-59頁
    5.2.1 純菌接合轉移體系的建立第55頁
    5.2.2 樣品DNA的提取第55頁
    5.2.3 抗性基因定量PCR檢測第55-57頁
    5.2.4 細菌胞外聚合物(EPS)的提取第57頁
    5.2.5 溶解性多糖的測定第57-58頁
    5.2.6 蛋白質的測定第58-59頁
  5.3 結果與討論第59-64頁
    5.3.1 離子液體對抗性基因水平轉移的影響第59-62頁
    5.3.2 離子液體對細菌EPS含量的影響第62-64頁
  5.4 本章小結第64-66頁
結論第66-68頁
致謝第68-70頁
參考文獻第70-82頁
作者簡介第82頁
攻讀碩士學位期間發表的論文第82-83頁

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