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泛素交聯酶RAD6B在UV誘導的DNA損傷修復中作用的研究

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泛素交聯酶RAD6B在UV誘導的DNA損傷修復中作用的研究
論文目錄
 
摘要第1-5頁
Abstract第5-7頁
英文縮略表第7-11頁
第一章 前言第11-20頁
  1.1 紫外線輻射第11-12頁
    1.1.1 紫外線的作用第11頁
    1.1.2 紫外線的危害第11-12頁
  1.2 DNA損傷與修復第12-14頁
    1.2.1 引起DNA損傷的原因第12-13頁
    1.2.2 DNA損傷的類型第13-14頁
  1.3 DNA損傷的修復及其意義第14-15頁
  1.4 DNA損傷修復與泛素化第15-17頁
    1.4.1 泛素與泛素化第15-16頁
    1.4.2 組蛋白泛素化與DNA損傷修復第16-17頁
  1.5 RAD6基因第17-18頁
    1.5.1 RAD6泛素交聯酶第17頁
    1.5.2 RAD6與DNA損傷修復第17-18頁
  1.6 本研究的目的及意義第18-20頁
第二章 材料與方法第20-32頁
  2.1 實驗材料和設備第20-25頁
    2.1.1 細胞系第20頁
    2.1.2 主要試劑、材料第20-22頁
    2.1.3 主要抗體第22頁
    2.1.4 主要儀器第22-24頁
    2.1.5 溶液配制第24-25頁
  2.2 實驗方法第25-32頁
    2.2.1 細胞培養第25-27頁
    2.2.2 通過CRISPR/Cas9基因敲除技術敲除RAD6B第27頁
    2.2.3 紫外線照射細胞誘導損傷第27頁
    2.2.4 CCK8第27-28頁
    2.2.5 Hoechst染色法測定凋亡細胞第28頁
    2.2.6 全蛋白提取第28-29頁
    2.2.7 組蛋白提取第29頁
    2.2.8 BCA法測蛋白濃度第29頁
    2.2.9 蛋白免疫印跡(Western Blotting)第29-30頁
    2.2.10 免疫熒光(IF)第30-31頁
    2.2.11 統計學分析第31-32頁
第三章 結果第32-42頁
  3.1 利用CRISPR/Cas9技術構建RAD6B缺陷細胞第32-33頁
  3.2 RAD6B參與UV誘導的DNA損傷修復第33-35頁
  3.3 RAD6B在UV誘導的DNA損傷修復通路中的位置第35-37頁
  3.4 RAD6B缺陷對組蛋白泛素化水平的影響第37-38頁
  3.5 RAD6B缺陷增加了細胞對UV的敏感性第38-42頁
第四章 討論第42-45頁
  4.1 RAD6B基因缺陷細胞的獲得第42頁
  4.2 RAD6B在DNA損傷修復中的作用第42-44頁
  4.3 RAD6B調控p53蛋白水平第44-45頁
第五章 結論第45-46頁
參考文獻第46-50頁
在學期間研究成果第50-51頁
致謝第51頁

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